期刊简介
本刊为西南医科大学主办，经国家新闻出版署批准，向国内外公开发行的综合性医学学术期刊，其前身为《泸医资料》，创办于1973年。本刊自创办以来，得到社会各界及学院各级领导的大力支持，办刊条件和办刊水平都有较大提高。
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首页>西南医科大学学报杂志
- 杂志名称：西南医科大学学报杂志
- 主管单位：四川省教育厅
- 主办单位：西南医科大学
- 国际刊号：2096-3351
- 国内刊号：51-1772/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：全区优秀学报三等奖期刊收录：万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中)
pET 22b-TP17表达载体的构建与鉴定
李佳凌；李尹凤；汤军；蔡延森
关键词：梅毒螺旋体, 原核表达载体, 质粒pET 22b, 重组蛋白的表达
摘要：目的:采用原核基因工程技术构建表达梅毒螺旋体外膜脂蛋白TP17的载体,并进行酶切鉴定,为获得重组抗原TP17及其用于梅毒血清学诊断试剂的研究奠定基础.方法:将化学合成的寡核苷酸(oligo)通过PCR的方法拼接成TP17目的基因的序列,并将合成好的序列克隆入pMD18-T Simple载体.以pMD18-T Simple-TP17为模板,PCR扩增TP17基因片段.PCR产物通过1.5％琼脂糖凝胶电泳回收TP17条带,随后用EcoRⅠ和Xho Ⅰ对TP17回收所得片段及目的载体pET 22b进行双酶切并连接.连接产物电转化至感受态细胞DH10B中后,挑取克隆,提取质粒并鉴定.后将质粒转化至BL21菌株中.挑取克隆,提质粒,进行鉴定.结果:PCR扩增片段、双酶切均出现445 bp大小的目的基因条带,与预期结果相符.结论:本研究成功构建了重组质粒pET 22b-TP17,为下一步用IPTG诱导BL21菌株表达重组目的蛋白的研究奠定了基础.
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