期刊简介
本刊为西南医科大学主办，经国家新闻出版署批准，向国内外公开发行的综合性医学学术期刊，其前身为《泸医资料》，创办于1973年。本刊自创办以来，得到社会各界及学院各级领导的大力支持，办刊条件和办刊水平都有较大提高。
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首页>西南医科大学学报杂志
- 杂志名称：西南医科大学学报杂志
- 主管单位：四川省教育厅
- 主办单位：西南医科大学
- 国际刊号：2096-3351
- 国内刊号：51-1772/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：全区优秀学报三等奖期刊收录：万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中)
海马神经元原代培养方法
肖兴莉；杨朝鲜；高小青；陈秀
关键词：海马神经元, 原代培养, 细胞保存培养
摘要：目的:掌握海马神经元的有效培养方法和细胞保存培养方法,利于细胞模型的建立.方法:取出出生1d的SD大鼠海马,联合机械吹打法和胰酶消化法分离海马细胞,加入DMEM/F12+10％FBS制备细胞悬液,接种在玻璃培养瓶内1～2 d,收集上清细胞液、离心、重悬细胞;再接种在培养板上,培养1d后,全液更换为Neurobasal+2％ B27,以后每3d半量换液.利用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;利用NF-200、Neu-N抗体免疫荧光、免疫组化技术鉴定海马神经元;利用96孔板培养细胞,计数每个孔海马细胞比例;利用MTT法测定细胞活性.结果:接种在培养板上第1d细胞贴壁,第3～4 d细胞长出突触,第7～8d细胞突触生长迅速,第11～13 d细胞交织成网状,第15～20 d细胞生长旺盛,20 d后细胞形态开始改变.免疫荧光技术鉴定细胞突触呈红色,细胞核呈绿色;免疫组化技术鉴定突触和胞核都呈棕黄色.细胞纯度95～97.5％,细胞活性以15～17 d高(93.94 ～ 95.13％),与其他时间点比较,P＜0.01.结论:该方法简便可行,节约取材及时间,可获得纯度高、活性好的海马细胞,为后续研究提供实验基础.
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